作者：林功标; 肖健云; 邱元正; 王承龙; 田勇泉...细胞角蛋白13基因克隆功能分析氯霉素乙酰转移酶
摘要：目的探讨细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)基因表达调控的机理,研究CK13基因5′旁侧不同基序对其转录活性的影响. 方法采用分子克隆结合报告基因分析的方法,构建CK13基因5′旁侧513 bp内不同基序与氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)报告基因增强子载体pCAT的重组体,通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞,检测各报告基因载体CAT的相对活性. 结果 CK13基因5′旁侧起始密码子ATG上游-nt.325～-nt.207间119 bp中具有某种抑制子元件,-nt.206～-nt.94间113 bp中具有某种增强子元件. 结论 CK13基因5′旁侧513 bp内存在促进及抑制CK13基因表达的反应元件,进一步定位这些顺式反应元件并研究与之相互作用的反式作用因子,可望阐明CK13基因表达调控及组织特异性表达的详细机理.
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