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RNA干扰技术对瘢痕疙瘩中结缔组织生长因子表达及胶原代谢的影响

作者:李雪阳; 金培生; 沈才齐; 张爱君; 陶常波瘢痕疙瘩成纤维细胞rna干扰结缔组织生长因子

摘要:目的利用RNA干扰(RNA inteferenc,RNAi)技术探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对人瘢痕疙瘩(keloid,KD)中胶原代谢的影响。方法将针对人CTGF基因设计合成的3对特异性小干扰RNA(siRNA)-CTGF分别转染体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFB),通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)筛选出干扰人KFB CTGF基因表达最佳的siRNA,而后构建质粒,采用RNAi技术,通过RT-PCR和Western印迹检测此质粒转染KFB后瘢痕疙瘩组织中CTGF表达量的变化及胶原含量的变化,并与对照组比较。结果第3对(C3)siRNA-CTGF转染人KFB后,CTGF的基因表达及胶原蛋白表达水平显著受抑,其抑制率为86.8%及65.6%。结论质粒siRNA—CTGF转染瘢痕疙瘩成纤维细胞后有效沉默CTGF的表达,进而使胶原合成降低;CTGF对瘢痕疙瘩形成过程中胶原蛋白的合成有促进作用。

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中华医学美容

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