作者:马攀; 林升; 刘洪臣; 马军利; 顾斌; 鄂玲...格列美脲成骨细胞下颌骨
摘要:目的研究格列美脲(glimepiride)对大鼠下颌骨成骨细胞PI3K/Akt通路的影响。方法分离培养原代下颌骨成骨细胞,进行成骨细胞鉴定,将成骨细胞以1×10^5接种于25cm^2培养瓶中,细胞融合后加入10μmol/L格列美脲分别干预0、15、30、60、120min。提取蛋白,取等量蛋白,采用凝胶电泳,分别加入兔抗大鼠PI3KP85、Akt/P-Akt抗体、IRS-1/P-IRS-1抗体和G肌动蛋白,37℃孵育4h,洗膜后,经辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG孵育50min,化学发光法显示抗原抗体复合物,X线片显影并定影,所有杂交信号在Labworks4.5成像分析仪系统测定条带密度。蛋白目的条带水平用与β肌动蛋白的比值表示。以上实验重复3次。结果在格列美脲诱导下,PIKP85、Akt/P—Akt、IRS-1/P—IRS-1表达显著提高。结论格列美脲在成骨细胞中也能激活PI3K/Akt通路。
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