作者：杨国安; 王玉林; 王宏坤; 庞春艳干扰sost基因成骨细胞
摘要：目的：利用siRNA干扰技术沉默SOST基因，观察其对大鼠成骨细胞的影响，探讨SOST，siRNA治疗骨质疏松症（ OP ）的可能性。方法：实验分对照组、空载体组、SOST-siRNA1组及SOST-siRNA2组，将成功构建的10μg SOST-siRNA1和SOST-siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染大鼠成骨细胞，空载体组大鼠成骨细胞转染等剂量的pGFP-VRS空载体。转染后24 h、48 h、72 h和96 h荧光倒置显微镜下观察细胞转染效率，实时荧光定量RT-PCR法检测4组大鼠成骨细胞中SOST-mRNA的表达水平，ELISA法检测4组细胞上清中碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白表达水平变化。结果：成功构建SOST-siRNA 质粒载体， SOST-siRNA 可以抑制大鼠成骨细胞中SOST-mRNA的表达；促进细胞上清中Ⅰ型胶原蛋白表达。结论：SOST-siRNA抑制大鼠成骨细胞中SOST-mRNA的表达后，可以促进细胞上清中Ⅰ型胶原蛋白表达，同时促进成骨细胞的发育，提示其对OP有一定的治疗作用。
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