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葡萄籽原花青素提取物对牛晶状体上皮细胞增殖及细胞周期的影响

作者:罗琰 胡义珍 张鹏举 曹阳 徐志蓉 陈博葡萄籽原花青素提取物晶体上皮细胞白内障后发性增殖细胞周期

摘要:目的观察葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对牛晶状体上皮细胞(bovine lens epithelial cells,BLECs)的增殖及细胞周期的影响,为后发性白内障的药物治疗提供新的研究方向。方法首先进行BI正Cs的原代及传代培养,取第2~第3代的BLECs分别采用MTT法、流式细胞术及免疫组化SP染色法进行实验.研究不同浓度及作用时间的GSPE对体外培养的BLECs的增殖及细胞周期的影响。结果GSPE能明显抑制BI正Cs的增殖,并呈现剂量和时间依赖性。在作用24h后,随着GSPE浓度的增高(20μg/ml,60μg/ml,100μg/m1),A值逐渐变小(0.343±0.079,0.252±0.029,0.137±0.011),抑制作用逐渐增强(P〈0.01)。100μg/ml GSPE作用BLECs24h、48h、72h后。A值分别为0.137±0.011、0.096±0.025、0.055±0.008,差异有非常显著的统计学意义f火0.01)。流式细胞术结果显示:经过GSPE处理,BLECs的GdG,期细胞数量增加,S期、G2/M期明显减少。100μg/mlGSPE作用24h后,G0/G1期细胞为83.67%±5.63%,阴性对照组为59.13%±5.71%,差异有统计学意义(P〈O.05)。免疫组化结果:GSPE剂量组中p21蛋白的表达增加.阳性细胞率从28.75%±1.25%增加到86.73%±5.11%.与阴性对照组7.73%±1.75%相比,差异有非常显著的统计学意义(P〈0.01)。结论GSPE通过上调p21蛋白的表达诱导细胞周期停滞于G0/G1期,能有效地抑制牛晶状体上皮细胞增殖,可能成为后发性白内障的药物治疗研究的新方向。

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