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谷氨酸诱导对鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体的调控

作者:夏晓波 周霞 曾琦视网膜神经胶质生物转运谷氨酸细胞培养的

摘要:目的研究底物谷氨酸对视网膜Müller细胞L-谷氨酸和L-天门冬氨酸转运体(GLAST)的调控作用。方法采用L^-3H-谷氨酸摄取分析方法研究底物谷氨酸诱导对GLAST活性影响。并提取细胞总蛋白,采用免疫印迹法分析视网膜Müller细胞GLAST蛋白质表达量的差异。结果在培养的鼠视网膜Müiler细胞中加入不同浓度的谷氨酸培养30min后,发现随着底物谷氨酸浓度增加(5~1000μmol/L),L^-3H-谷氨酸的摄取量增加。平均摄取量分别为(3100.7±86.8)、(3247.0±84.2)、(3840.0±118.6)、(4493.7±229.2)、(6429.0±81.5)、(6305.3±31.0)、(6346.3±36.2)cpm·mg^-1·ml^-1。当谷氨酸浓度为100μmol/L时,L^-3H-谷氨酸摄取量最大。随着谷氨酸浓度的增加,谷氨酸转运体GLAST蛋白质的表达量增加,当谷氨酸浓度为100μmol/L时,GLAST蛋白质表达量达最大。结论谷氨酸的底物诱导可增加GLAST摄取活性,且上调GLAST蛋白质的表达。

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