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体外转染人发状分裂相关增强子-1基因重塑视网膜新生血管的研究

作者:唐仕波; 李斌; 张革; 陈剑虹; 李宝金转录因子重组基因视网膜新生血管化

摘要:目的探讨体外转染人发状分裂相关增强子1(HESR-1)基因至视网膜血管内皮细胞并重塑视网膜新生血管的可行性.方法将HESR-1克隆至pcDNA 3.1+载体内,组成pcDNA 3.1+ HESR-1重组质粒,原代培养人视网膜血管内皮细胞,实验中加入10 ng血管内皮生长因子(VEGF)刺激内皮细胞生长,模拟体内新生血管内皮细胞激活状态,以脂质体转染pcDNA 3.1+ HESR-1重组质粒至培养的细胞内,应用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)第2受体(KDR)和紧密连接蛋白(occludin)表达的阳性率,采用免疫印迹法分析HESR-1对occludin表达的调控作用,体外建立视网膜血管模型,检测HESR-1对血管通透性的影响.结果 HESR-1基因成功转染至血管内皮细胞,KDR表达阳性率下降,occludin表达增强.重塑的体外血管样结构通过HESR-1的作用能降低血管通透性.结论 HESR-1基因能下调KDR的表达,增强occludin的表达,减少血管渗漏,达到重塑视网膜新生血管的目的;可为视网膜新生血管的治疗提供新的思路和方法.(中华眼科杂志,2005,41:1027-1032)

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