作者：杨杏芬; 黄琼; 黄俊明; 李志; 蔡玟; 黄建...流式细胞术营养保健品营养评价流式细胞术检测保健食品外周血nk细胞巨噬细胞吞噬大鼠实验模型外周血淋巴细胞计数阳性对照组
摘要：目的建立保健食品增强免疫力功能评价指标的流式细胞术检测方法,并初步评价其应用价值.方法 3种受试物蛋白粉、参茸膏和灵芝虫草菌丝体小鼠实验模型的实验剂量组均按人体推荐量的5、10、30倍进行灌胃,阴性及阳性对照组均给予等量纯净水,阳性对照组为给药结束前3 d开始每天灌胃给予25 mg/kg 左旋咪唑,并于给药结束当天用2% 绵羊红细胞进行免疫;大鼠实验模型采用拌饲法按人体推荐量的25、50倍给予受试物;实验结束后同步检测以下指标:(1)传统指标:包括刀豆素A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、小鼠脾自然杀伤(NK)细胞活性测定、绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验.(2)流式细胞仪检测指标:小鼠外周血淋巴细胞计数,大、小鼠T、NK细胞表面活化抗原检测以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球功能.结果给予受试物蛋白粉后,0.83、1.67、5.01 g/kg 剂量组小鼠T、B淋巴细胞的相对比例和绝对数量与阴性对照组间差异无统计学意义;给予受试物参茸膏后,3.75、7.50和15.0 ml/kg剂量组的小鼠外周血T淋巴细胞CD69表达阳性比例较阴性对照组明显升高,与其他传统检测指标有良好一致性;蛋白粉0.83、1.67 g/kg 剂量组小鼠外周血NK细胞CD69表达阳性比例较阴性对照组明显升高,且与NK细胞活性测定结果有良好一致性;给予1.50 g/kg 剂量灵芝虫草菌丝体的大鼠外周血NK细胞CD25表达阳性比例较阴性对照组升高;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验:传统检测方法未发现对照组与剂量组有明显差别,而流式细胞术检测结果显示:灵芝虫草菌丝体0.15、0.30和0.90 g/kg 剂量组总吞噬比例增加, 0.30、0.90 g/kg剂量组吞噬指数均提高.结论应用流式细胞术检测保健食品增强免疫力功能指标,与传统方法检测结果具有良好一致性,且具有更高的敏感性,在检测和评
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