作者：许吕宏; 方建培; 翁文骏; 徐宏贵; 叶启翔致敏受者骨髓细胞造血干细胞移植移植物排斥
摘要：目的建立致敏动物模型，研究致敏对异基因骨髓细胞植入的影响及机制。方法将C57BL／6小鼠脾细胞经尾静脉注射到BALB／c小鼠体内建立致敏动物模型，应用二抗结合实验及补体依赖细胞毒性反应检测血清抗体。以非致敏或致敏BALB／c小鼠为受鼠，经照射预处理后予以1×10^7C57BL／6供鼠骨髓细胞。移植后于不同时间点（2、12和48h）分离受鼠外周血、脾脏及骨髓等细胞，检测供鼠细胞在致敏受鼠体内各组织的分布。移植后记录各组受鼠的生存情况，监测造血重建与骨髓恢复情况。体外分离非致敏或致敏受鼠的血清及脾细胞，与异基因骨髓细胞相孵育，通过免疫实验计算细胞毒性指数。结果二抗结合实验和补体依赖细胞毒性反应均证实致敏受鼠血清中含有高滴度的供鼠反应性抗体。骨髓移植归巢实验结果表明，与非致敏组相比，异基因骨髓细胞在致敏受鼠的外周血、脾脏及股骨的分布均明显减少。生存分析结果发现非致敏组小鼠于照射后能长期存活，而致敏组小鼠于照射后12～15d全部死亡。移植后第14天，非致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为（3240±300）×10^6/L和（396±27）×10^6／股骨，而致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为（320±80）×10^6/L和（6±2）×10^6／股骨，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。移植后第7天，供鼠细胞在非致敏组和致敏组骨髓所占的百分比分别为（48．07±4．70）％和（0．77±0．11）％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。体外通过补体依赖细胞毒性反应实验、细胞毒性淋巴细胞的杀伤作用和抗体依赖细胞介导细胞毒性作用实验表明，敛敏组受鼠的细胞毒性指数均明显高于非致敏组。结论成功建立脾细胞输注致敏的小鼠动物模型，致敏受体完全排斥异基因供体骨髓细胞，作用机制与免�
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