作者：刘容容; 马劼; 陈萍; 莫武宁; 林伟雄; 赖...珠蛋白类脂质体寡核苷酸类反义基因表达调控
摘要：目的研究脂质体转染反义寡核苷酸（ASON）对重型β-地中海贫血（β-地贫）患者红系细胞α-珠蛋白基因的调控作用，为基因治疗β-地贫提供新的思路。方法将前期实验筛选获得的高效抑制α-珠蛋白基因表达的ASON以最佳浓度作用于体外培养的重型β-地贫患者红系细胞，并设空白对照组，经实时荧光定量RT—PCR分析ASON组和空白对照组中红系细胞α、β、γ-珠蛋白基因表达情况，观察ASON对相应珠蛋白基因表达的影响，通过高效液相色谱法（HPLC）检测ASON作用后血红蛋白水平，并经透射电子显微镜（电镜）观察ASON作用前后红系细胞内α-珠蛋白肽链沉积情况，了解ASON对β-地贫患者红系细胞内过剩α-珠蛋白肽链的影响。结果实时荧光定量RT—PCR结果显示ASON组α-珠蛋白基因mRNA表达（9．04±0．29）较空白对照组（24．23±0．29）减低（P〈0．01），α/（β＋γ）珠蛋白比例失衡得到改善[ASON组、空白对照组分别为（0．79±0．02）、（2．26±0．06），P〈0．01]；HPLC检测表明ASON作用后仅-珠蛋白基闪表达下调，HbA：和HbF表达增加；透射电镜结果证实ASON作用后重型β-地贫患者红系细胞内过剩的α-珠蛋白肽链沉积减少，特别是在早期幼稚红细胞中，在空白对照组中沉积物无明显变化。结论高效ASON可抑制体外培养的重型β-地贫患者红系细胞α-珠蛋白基因表达，有助于改善珠蛋白基因α（β＋γ）比例失衡，并减少过剩α-珠蛋白肽链在红系细胞内的沉积，为基因治疗β-地贫提供新的思路，
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