作者:贺钰磊; 曹励之; 杨明华; 赵明一; 俞燕; ...wasp家族富含脯氨酸同源蛋白1基质金属蛋白酶k562细胞系rna干扰白血病浸润
摘要:目的研究WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WAVE1)对K562细胞侵袭的影响及其机制。方法免疫荧光观察WAVE1与基质金属蛋白-2(MMP-2)在细胞中的分布。利用pcDNA3.1-WAVE1重组真核表达质粒转染K562细胞,将WAVE1基因特异性小片段干扰RNA(WAVE1 siRNA)转染K562细胞,Transwell法检测细胞侵袭能力;实时PCR和Western blot检测转染前后WAVE1及MMP-2的表达。结果①WAVE1与MMP-2主要表达于K562细胞的细胞膜上且两者有共定位。②与对照组K562细胞相比,转染pcDNA3.1-WAVE1 24h及48h后K562细胞MMP-2 mRNA表达分别增加295%和198%,蛋白表达水平分别增加80%和23%;转染特异性WAVE1 siRNA 24h及48h后K562细胞MMP-2 mRNA表达分别下降81%和28%,蛋白表达分别下调36%和53%。③与对照组K562细胞相比转染pcDNA3.1-WAVE1后细胞侵袭能力增强,而干扰WAVE1表达后K562细胞侵袭能力减弱。结论WAVE1与MMP-2在K562细胞可能具有协同作用;WAVE1参与了K562细胞的侵袭转移过程,其机制可能与调控MMP-2的表达相关。
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