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慢病毒载体介导的基因转导技术对人脐血CD34^+细胞基因表达谱的影响

作者:白元松; 陈玉丙; 石张镇; 卢振霞慢病毒载体胎血造血干细胞基因疗法

摘要:目的研究慢病毒载体(1entivirus vector)基因转导技术对脐血CD34^+细胞基因表达的影响。方法将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的第三代自身失活(self-inactivating,SIN)慢病毒载体导入CD34^+细胞。提取被病毒感染细胞的总RNA,应用cDNA微阵列技术对慢病毒载体感染的脐血CD34’细胞及正常对照细胞进行差异基因表达谱分析。结果在23000个被检测基因中,与无基因导入的对照组细胞比较,基因导入细胞中表达的上调基因共2个,分别为IGSF4和HEC基因,下调基因共6个,分别为HNRPA0、ZNF205、FLNA、CLK3、LDB1、ACTA1。进一步对筛选出的差异表达基因进行半定量RT-PCR分析证实基因表达水平变化不明显。结论本实验中应用的慢病毒载体对脐血CD34^+细胞基因表达无明显影响,有望成为临床基因治疗有效且安全的工具。

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