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小鼠骨髓腔内输注人脐血造血干/祖细胞植活水平的观察

作者:高静韬; 卢士红; 李妍涵; 杨舟; 许静; 郑...造血干细胞移植骨髓腔注射小鼠造血重建

摘要:目的探讨小鼠骨髓腔内输注能否增强人脐血造血干/祖细胞(HS/PC)异种移植的植活能力。方法将不同数量(1×10^3、1×10^4、0.5×10^5、1×10^5、5×10^5)的人脐血CD34^+细胞经尾静脉和骨髓腔途径移植入经亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠。于指定时间点处死小鼠,用PCR法检测人17号染色体α-微卫星特异性片段及用流式细胞术检测人源CD45^+细胞,观察脐血CD34^+细胞在移植小鼠左、右两侧胫骨和股骨及脾脏等部位的归巢及其长期植活能力。结果异种移植后24h,经骨髓腔移植5×10^5 CD34^+细胞的小鼠肝、脾、肺组织,外周血,左右两侧胫骨和股骨、骨髓细胞均表达人17号染色体α-卫星特异性片段。不同数量的人脐血CD34^+细胞经骨髓腔途径移植入NOD/SCID小鼠后,8周时其植活良好(检测部位包括输注部位右侧胫骨,以及非输注部位右侧股骨、左侧胫骨、左侧股骨、脾脏及外周血)。分别经尾静脉和骨髓腔两种途径输注同一来源的人脐血CD34^+细胞1.0×10^5,8周时两组间人造血细胞植活水平分别为(44.063±20.095)%和(45.881±22.316)%,差异无统计学意义(P〈0.05);而将移植CD34^+细胞数降至1.0×10^4时,则经骨髓腔途径输注的人脐血CD34^+细胞小鼠植活水平(54.019±31.338)%显著优于尾静脉输注途径[(12.197±10.350)%,P〈0.01)];当CD34^+细胞输注量降至1.0×10^3时,仅有骨髓腔内输注组小鼠能见到人脐血CD34^+细胞植活,且植活部位通常为非输注部位骨骼。结论小鼠骨髓腔内移植能够增强人脐血造血干/祖细胞的植活水平。

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