作者：范磊; 周梦云; 沈飞; 谢丽倩; 阮长耿基因mer受体酪氨酸激酶血管新生细胞系内皮生长因子受体
摘要：目的 探讨受体酪氨酸家族成员Mer基因对体外血管形成过程的影响及其具体作用机制。方法 利用脂质体法将人全长Met基因真核表达质粒转染到内皮细胞株HMEC-1细胞中，G418筛选转染细胞得到阳性克隆，利用PCR和Westernblot分别在mRNA和蛋白水平验证转染情况。利用Transwell和Matrigel分别观察Mer基因过表达对于内皮细胞迁移能力和血管形成能力的影响。通过荧光定量PCR筛选血管内皮生长因子（VEGF）-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及血管内皮生长因子受体（VEGFR）-1、VEGFR-2基因的表达情况。结果 经过G418筛选后，PCR和Westernblot检测结果显示Mer基因在阳性克隆细胞中有较高水平表达，分别较空质粒对照组上升3．61倍和2．12倍；高表达Mer的HMEC一1细胞迁移能力[迁移到Transwell下室壁的细胞为（21±6）／视野]较对照组[（36±11）／视野]明显下降。体外血管形成实验也表明高表达Mer基因的HMEC-1细胞血管形成能力明显下降，抑制率为76．9％；荧光定量PCR结果显示VEGF-C和VEGFR-2表达明显下降，VEGF-C表达量为对照组的44．7％，VEGF-C表达为对照组的25．6％。结论 Mer过表达可以显著抑制HEMC-1细胞的迁移能力和血管形成能力，并且可能是通过VEGF-C／VEGFR-2信号途径发挥作用。
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