作者：周斌; 李抒; 顾东生; 武开宏; 刘鹏霞; 韩...外周血单个核细胞缺血造血干细胞血管内皮生长因子
摘要：目的对动员的外周血单个核细胞（PBMNC）和动员的去除CD34^＋细胞的PBMNC移植治疗裸鼠下肢缺血的疗效进行比较，以探讨PBMNC的治疗机制。方法经过单采获得G-CSF动员的PBMNC后，一部分通过CD34磁珠抗体分选得到去除CD34^＋细胞的PBMNC。动员的PBMNC和动员的去除CD34^＋细胞的PBMNC荧光标记后按1×10^6细胞或相应体积的PBS分别局部肌肉注射移植到裸鼠缺血下肢。观察下肢血流灌注以及毛细血管密度。用ELISA法检测下肢肌肉的血管内皮生长因子（VEGF）表达，并进一步观察表达的VEGF是否由移植细胞分泌。结果PBMNC移植后缺血下肢血流明显恢复，毛细血管密度明显增加，但去除CD34^＋细胞的PBMNC移植组疗效有所下降。细胞移植后4周，PBMNC组的血流灌注由（20．3±4．2）％恢复为（96．4±5．6）％，对照组仅恢复为（71．3±4．4）％（P〈0．01），去除CD34^＋细胞组恢复为（83．8±5．2）％（P〈0．05）。PBMNC组血管密度为（521±47）／mm^2，去除CD34^＋细胞组为（3964-21）／mm^2（P〈0．05），但仍高于对照组[（276±43）／mm^2]（P〈0．05）。在PBMNC组可以观察到移植的细胞整合到缺血的毛细血管壁。缺血肌肉VEGF的表达明显升高，其共表达VEGF和移植的单个核细胞。结论移植G-CSF动员的PBMNC不但可以通过干细胞整合到血管壁的机制促进血管生长，还可以通过提供细胞因子的机制促进血管生长。去除CD34^＋细胞削弱了动员的PBMNC移植治疗肢体缺血的血管新生效应。
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