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体外转染JWA核酶逆转录病毒载体对人骨髓基质细胞黏附功能的影响

作者:常城; 陈幸华; 陆俊羽; 孔佩艳; 曾东风; ...骨髓基质细胞jurkat细胞黏附jwa基因核酶

摘要:目的探讨JWA核酶基因转染对人骨髓基质细胞(BMSC)黏附功能的影响。方法设计合成JWA核酶基因并构建于逆转录病毒载体pLXSN上,转染体外培养的人BMSC(BMSC—JWARZ组),应用半定量RT—PCR法(sqRT—PCR)测定细胞内JWAmRNA的表达,流式细胞仪检测BMSC细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管黏附分子-1(VCAM-1)的表达,并检测共培养条件下BMSC对Jurkat细胞的黏附率及Jurkat细胞增殖变化。以pLXSN空载体转染的BMSC(BMSC-pLXSN组)及未转染细胞(BMSC组)为对照。结果BMSC—JWARZ组JWAmRNA表达量[吸光度(A)值]为0.187±0.045,较BMSC—pLXSN组(0.382±0.039)及BMSC组(0.366±0.048)显著降低;BMSC—JWARZ组细胞表面ICAM-1阳性细胞率为(16.11±3.93)%,较B—pLXSN组[(38.24±5.37)%]及BMSC组[(36.27±6.19)%]显著降低;BMSC—JWARZ组细胞表面VCAM.1阳性细胞率为(12.08±3.34)%.较BMSC—pLXSN组[(26.88±5.17)%]及BMSC组[(24.55±3.68)%]显著降低;B—JWARZ组细胞对Jurkat细胞的黏附率为(23.65±5.27)%,较BMSC—pLXSN组[(35.14±8.11)%]及BMSC组[(33.72±6.29)%]显著降低,与BMSC—JWARZ组细胞共培养的Jurkat细胞倍增时间为58.7h,明显长于与BMSC—pLXSN组(44.1h)及BMSC组(43.7h)细胞共培养时。结论JWA核酶基因转染可抑制人BMSC内JWA基因的表达,抑制骨髓基质细胞黏附功能。

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