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Mcl-1基因在HL-60细胞对全反式维甲酸耐药机制中的作用

作者:付劲蓉; 刘文励; 周剑锋; 孙汉英; 郑邈; ...维甲酸耐药机制免疫组化染色法

摘要:目的探讨髓系白血病-1(Mcl-1)基因在HL-60细胞对全反式维甲酸(ATRA)耐药中的作用.方法采用少量、递增、反复ATRA诱导HL-60细胞,建立ATRA耐药细胞系HL-60/ATRA;利用鸡尾酒法制备Mcl-1基因的小片段干扰RNA(Small interference RNA,siRNA),并通过脂质体介导将其导入HL-60/ATRA细胞;Western blot检测Mcl-1蛋白在细胞中的表达;MTT实验、NBT还原反应实验、TUNEL免疫组化染色法分别检测细胞的增殖、分化和凋亡情况.结果HL-60/ATRA细胞Mcl-1蛋白相对灰度值为0.624±0.127,较野生型HL-60细胞(相对灰度值为0.162±0.127)明显高表达,并可耐受100 nmo/L的ATRA,而不发生分化、凋亡[凋亡率为(1.0±0.5)%];Mcl-1 siRNA导入HL-60/ATRA细胞后,Mcl-1蛋白表达下调(相对灰度值为0.267±0.086),恢复对ATRA的敏感性[凋亡率为(18.5±4.5)%].结论Mcl-1基因可能参与了HL-60细胞ATRA耐药的形成;抑制Mcl-1基因可能成为一种新的逆转ATRA耐药的策略.

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