作者：傅启华; 王文斌; 丁秋兰; 周荣富; 武文漫...突变转染抗凝血酶分子机制酶缺陷cho细胞细胞免疫cos7细胞大引物重组表达质粒
摘要：目的研究抗凝血酶(AT)基因C2759T(Leu99Phe)突变引起AT缺陷症的分子机制.方法用大引物法构建C2759T突变体AT重组表达质粒(ATM2759),并将其和正常AT重组质粒(ATN)分别用Superfect试剂转染COS7细胞或CHO细胞,进行体外表达试验和细胞免疫荧光染色.结果转染ATM2759的COS7细胞,培养上清液和细胞裂解液中的AT抗原(AT:Ag)分别为ATN的35.63%和174.97%,而培养上清液中的AT活性(AT:A)为ATN的47.73%.细胞免疫荧光试验证实,转染ATM2759的CHO细胞,其荧光强度明显高于转染ATN的CHO细胞.结论Leu99Phe突变可能不是由于影响AT与肝素的结合而导致AT缺陷,而是由于突变导致AT分泌障碍和细胞内滞留所致.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
