作者：张海波; 孟旭; 韩杰; 陈唯军; 陈燕; 贾一...心脏移植移植物排斥基因表达单核细胞逆转录聚合酶链反应
摘要：目的建立外周血单核细胞检测心脏移植免疫排斥相关基因的研究方法，探讨基因在心脏移植术后免疫排斥监测中的临床价值。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术，以SYBR Green Ⅰ作荧光染料，GAPDH作内对照，观察心脏移植术后不同时期病人外周血单个核细胞中与免疫排斥相关基因的mRNA表达水平，并与病人术前基因表达水平对照。结果使用Primer Premier 5．0和Primer Express 3．0软件成功进行引物设计，并建立稳定检测的RT-PCR方法。心脏移植术前外周血单个核细胞16个与免疫排斥相关候选基因的mRNA的相对表达量与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。1TGA4、FKB、IL1R2、PF4、ITGAM、TGFB1、RHOU7种基因可能与机体免疫排斥状态有更大相关性。结论成功建立了荧光定量RT-PCR方法，检测外周血单个核细胞基因mRNA表达水平简便快速、特异、重复性好、可信度高具有良好的检测心脏移植早期排斥反应的应用前景。
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