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膜联蛋白A5抑制同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞组织因子的表达和活化

作者:李军; 陈涛; 王定淼; 宋毅峰; 洪梅血管肌细胞平滑肌膜联蛋白a5半胱氨酸凝血致活酶

摘要:目的研究膜联蛋白A5(Annexin A5)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)组织因子表达和活化的抑制作用。方法采用组织贴块法培养人脐动脉VSMC,应用α-肌动蛋白(actin)免疫组化法鉴定细胞。将不同浓度(10、100、500、1000μmol/L)的Hcy与VSMC孵育,在用Annexin A5(50μg/ml)或组织因子的单抗(10μg/ml)干预的条件下,流式细胞技术(FCM)检测VSMC的组织因子细胞膜表达,FX生成反应检测VSMC细胞培养液组织因子活性,Western blot检测VSMC的组织因子表达。结果用PBS作为对照的VSMC细胞膜表面有低水平的TF表达,阳性率为(4.01±2.11)%。Hcy作用4h后,100μmol/L即可诱导VSMCTF蛋白表达升高,阳性率为(14.01±3.72)%,1000μmol/L时达高峰,阳性率为(37.67±4.96)%。与PBS对照组细胞相比,Hcy能显著诱导细胞TF的表达。用100μmol/L的Hcy作用VSMC,加入Annexin A5或TF的单抗后,在4、8、16h均能有效抑制TF的细胞膜表达和培养液中TF活性。不同浓度的Annexin A5能显著抑制Hcy诱导的VSMCTF蛋白的表达。结论Annexin A5能抑制Hcy诱导的VSMC组织因子的表达和活化,对此作用过程的深入研究,可能为防治冠状动脉粥样斑块血栓的形成和发展提供新的契机。

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