作者:张秋月; 富建华; 薛辛东新生鼠原代培养鉴定
摘要:目的探讨新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞体外培养及鉴定方法,为早产儿肺损伤体外研究提供实验手段。方法取出生24h内新生Wistar大鼠肺组织,用胰酶和胶原酶消化,经离心和免疫吸附法纯化后培养。采用透射电镜和免疫荧光技术进行鉴定。结果体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞18~24h贴壁,呈多角形,岛状生长。培养24~48h细胞体积增大,胞浆内颗粒明显,72h后细胞内颗粒减少,6~7d细胞失去正常形态。透射电镜可见特异性结构板层小体,免疫荧光可见表面活性蛋白C表达。结论该方法是一种有效分离和纯化新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的方法,可用于肺泡Ⅱ型上皮细胞功能及早产儿肺损伤的体外研究。
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