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少突胶质前体细胞的培养及细胞缺氧缺糖模型的建立

作者:钟琳; 唐军; 姚裕家少突神经胶质细胞培养技术模型动物

摘要:目的 获取高纯度的大鼠少突胶质前体细胞系并建立细胞缺氧缺糖模型。方法 采用振荡分离纯化法和化学限定无血清培养基在体外获取纯化的大鼠少突胶质前体细胞,免疫荧光法对各分化阶段特异的表面抗原A2B5、O4、O1进行细胞鉴定。利用无糖培养基和连二亚硫酸钠造成O4阳性的少突胶质前体细胞的缺氧缺糖损伤,观察细胞的形态学改变,MTT法测细胞存活率。结果 获得纯度95%以上的大鼠少突胶质前体细胞,O4阳性少突胶质前体细胞出现缺氧缺糖损伤的形态学改变,并随缺氧缺糖时间延长而加剧;细胞存活率随缺氧缺糖时间的延长逐渐下降,30、60min和90min细胞存活率均低于正常对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 振荡分离纯化法是体外培养大鼠少突胶质前体细胞的可靠方法,利用无糖培养基和连二亚硫酸钠可以建立细胞缺氧缺糖模型。

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