作者:俞丽芬; 吴云林; 章永平; 乔敏敏; 钟捷; ...耐药细胞株胃腺癌信号通路表达差异rna基因谱表达水平
摘要:目的用基因芯片技术研究人胃腺癌5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞株SGC7901/R及其亲本细胞株SGC7901 JAK/STAT信号传导通路相关基因表达谱的差异.方法分别抽提两种细胞mRNA,经逆转录反应,用生物素标记的16-dUTP将两种细胞的mRNA分别标记成两种cDNA探针,并与载有一组靶基因的人JAK/STAT信号通路芯片进行杂交,通过软件对扫描图像进行数字化处理和分析,筛选2种细胞在该信号通路中有表达差异的基因.通过RT-PCR法分别对耐药细胞及其亲本细胞中的Stat3、核因子(NF)-KB1和bcl-x mRNA的表达水平进行检测.结果通过两种细胞株JAK/STAT信号通路的基因谱平行比较,筛选出人胃腺癌5-FU耐药细胞株及其亲本细胞株中有表达差异2倍以上的基因共70个,其中表达上调>2倍的40个,表达下调>2倍的30个.RT-PCR的验证结果与芯片的筛查结果基本相符.结论人胃腺癌5-FU耐药细胞株中JAK/STAT信号通路基因表达谱的变化研究是对胃癌多药耐药分子机制研究的有力补充.
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