作者：姬瑞娟; 乔梁; 黄超; 陈磊; 李玉泉; 杨向...脂肪源性干细胞起搏细胞支架材料组织工程起搏器
摘要：目的观察不同三维支架材料对棕色脂肪来源干细胞（BADSCs）诱导分化成起搏细胞的效果,为构建生物起搏器提供实验依据。方法将培养7 d的原代BADSCs分别种植到胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶3种不同的材料中,在不同时间用光镜和扫描电镜观察细胞-支架复合体中细胞形态学的变化,免疫荧光染色检测心肌细胞、起搏细胞相关蛋白的表达。采用单因素方差分析。结果细胞在3种支架上均能存活、增殖,LIVE/DEAD检测显示,培养3 d的胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶3种细胞-支架复合物死细胞率分别为（46.35±1.50）﹪、（47.00±1.60）﹪和（1.76±1.08）﹪,其中细胞在透明质酸水凝胶中死亡率最低,并且细胞-透明质酸水凝胶复合物可自发性地搏动,三组比较差异具有统计学意义（F=37.56,P〈0.05）。培养至2周时,胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶中Connexin45细胞阳性率分别为（10.67±1.25）﹪、（13.67±1.25）﹪和（21.00±1.60）﹪,差异有统计学意义（F=9.435,P〈0.01）,HCN2细胞阳性率分别为（11.00±1.60）﹪、（14.00±2.16）﹪和（34.33±3.68）﹪,差异有统计学意义（F=17.52,P〈0.01）,HCN4细胞阳性率分别为（18.67±2.05）﹪、（13.00±1.60）﹪和（66.00±2.94）﹪,差异有统计学意义（F=27.96,P〈0.01）,Sr细胞阳性率分别为（13.00±1.63）﹪、（14.33±1.24）﹪和（75.33±3.30）﹪,差异有统计学意义（F=36.40,P〈0.01）,水凝胶中Connexin45、HCN2、HCN4和Sr的细胞阳性率均高于胶原海绵和明胶海绵,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论 BADSCs在胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶中均能很好地生长和分化,但透明质酸水凝胶更适用于组织工程化起搏器的构建。
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