作者：刘菊芬; 阮光萍; 李自安; 王金祥; 庞荣清...绿色荧光蛋白质类慢病毒属转染骨髓间质干细胞荧光抗体技术
摘要：目的探讨最佳的生物标记方法示踪细胞，更好地观察细胞移植后在体内的归巢情况。方法本实验室用一种新型慢病毒（eGFP＋PUROLentivirus）转染了四种细胞，确定了四种细胞的最佳感染复数，细胞转染成功后，用最佳浓度的嘌呤霉素筛选，获得四种稳定的GFP阳性表达细胞株。所用的细胞包括人脐带间充质干细胞（hUC—MSC），树齁脐带间充质干细胞（TS—UC-MSC），人胚肾细胞（293T），C57BL小鼠骨髓间充质干细胞（C57．BMSC）。结果用新型慢病毒（eGFP＋PUROLentivirus）成功转染四种常用细胞，转染成功率100％，细胞成功标记上GFP荧光，并确定了最佳的嘌呤霉素使用浓度，确定了不同细胞的感染复数。最终确定TS—UC-MSC的最佳感染复数为240，hUC—MSC的最佳感染复数为150，293T的最佳感染复数为100，C57-BMSC的最佳感染复数为50。用带荧光的C57一BMSC细胞回输C57BL小鼠体内，冰冻切片在肝中找到标记细胞，在脾、肺、肾、心未找到标记细胞，说明外来细胞主要在肝脏中代谢。结论在细胞移植治疗时，细胞成功标记上GFP能在动物体内进行示踪，良好的细胞示踪方法可以很好地反映所研究细胞在体内外的动向。
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