广州地区携带blaCTX-M-15流行质粒的分子特征研究

作者：卓超 黎晓强 李小燕 金光耀 肖书念 钟南...流行质粒基因环境

摘要：目的 研究广州地区携带blaCTX-M-15质粒的分子特征.方法 以2007年到2008年期间来源于广州9家医院确证产CTX-M-15 ESBL的38株大肠埃希菌和47株肺炎克雷伯菌为研究对象,脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）法检测blaCTX-M-15阳性株的同源性,MIC法检测菌株对常用抗生素的敏感性.血清凝集试验确定大肠埃希菌血清型.接合试验了解携带blaCTX-M-15质粒的可接合性,限制性内切酶分析质粒的同源性.PCR分析大肠埃希菌的系统发育群,流行质粒的不相容群和耐药基因构成.结果 blaCTX-M-15阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别用PFGE确定为28个和30个基因型.携blaCTX-M-15大肠埃希菌的系统发育群以D群（67.8%）和A群（21.4%）为主.大肠埃希菌血清型呈散在分布,未发现O25：H4血清型.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ST型无明显集中趋势,大肠埃希菌中发现非O25血清型的ST131,肺炎克雷伯菌中发现2个新的tonB基因和2个新的ST型.58个独立克隆的代表菌株中有40株可将携blaCTX-M-15的质粒传递给受体菌E.coli C600（Rif）,其中大肠埃希菌有19株,肺炎克雷伯菌有21株.57.9%（11/19）的大肠埃希菌中携带blaCTX-M-15的质粒大小为65 kb,85.7%（18/21）的肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-15的质粒大小为92 kb.限制性内切酶分析显示,这2种质粒属流行质粒,分别命名为p^15-e和p^15-k.通过PCR调查,p^15-e存在blaCTX-M-15和ISEcpI;p^15-k上存在blaCTX-M-15、ISEcpI、aac（6＇）-Ⅰ b、aac（3＇）-Ⅲ、blaOXA-1、qnrB、qnrS、blaDHA-1、blaTEM-1.p^15-k同时被证实属于质粒不相容群FⅡ群.结论 广州地区存在携带blaCTX-M-15流行质粒的传播,且流行质粒的大小和基因结构与国外报道不同;无克隆株传播证据.

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