沙眼衣原体质粒蛋白pORF5生物学特性初步研究

作者：李忠玉 吴移谋 黄秋林 钟光明沙眼衣原体质粒分泌蛋白porf5

摘要：目的 分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨其生物学特征.方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建pORF5原核表达重组体并诱导表达融合蛋白 融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫小鼠,制备单克隆抗体和多克隆抗体,间接免疫荧光技术及免疫印迹鉴定抗体的特异性 分析pORF5质粒蛋白在感染细胞中的分布及表达模式特征.采用ELISA分析pORF5质粒蛋白在自然感染状态下的表达情况及免疫原性.结果 pORF5主要分布于宿主细胞质,但也少量分布在原体（EB）和网状体（RB）上,在细胞质中的分布模式与衣原体分泌蛋白酶样活性因子（CPAF）基本相似,激光共聚焦结果显示两者并不重叠 pORF5能与Ct生殖道感染患者血清发生强烈的免疫应答.结论 pORF5为衣原体分泌蛋白,并具有很强的免疫原性 在自然感染状态下,pORF5质粒蛋白基因被激活产生内源性靶蛋白.

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