B族链球菌表面蛋白C5a肽酶系统及鼻内黏膜免疫的研究

作者：薛冠华 李慎涛 杨永弘 于丽华 王爱华 王...b族链球菌c5a肽酶黏膜免疫皮下免疫调理吞噬

摘要：目的研究B族链球菌表面蛋白C5a肽酶（streptococcal C5a peptidase，ScpB）系统及其鼻内途径免疫后在小鼠血清及肺、直肠、阴道等黏膜部位特异性抗体水平，探讨ScpB蛋白黏膜免疫应答的效果。方法在大肠杆菌BL21中表达ScpB蛋白，亲和层析法进行纯化，质谱分析法对所纯化的蛋白进行鉴定。小鼠随机分为5组，每组10只。分别为对照组、皮下30μg组、鼻内5μg组、鼻内10μg组和鼻内30μg组。用ELISA法检测小鼠血清及黏膜萃取液中特异性抗体水平；调理吞噬试验检测ScpB蛋白抗血清的保护性功能。结果成功表达并纯化了ScpB蛋白；质谱分析和蛋白质库比较证实其为B族链球菌表面蛋白C5a肽酶的可能性分值为175；ELISA显示ScpB蛋白皮下30μg及鼻内不同剂量（5μg、10μg、30μg）免疫后均可诱发小鼠产生高水平特异性IgG抗体（P〈0．01），30μg剂量组IgG大于5μg及10μg剂量组（P〈0．05）；鼻内不同剂量（5μg、10μg、30μg）免疫后均可诱发小鼠产生高水平的黏膜特异性IgA抗体，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）；黏膜免疫组间无差异；30μg ScpB蛋白皮下免疫后黏膜特异性IgA抗体与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。ScpB抗血清对细菌具有调理吞噬作用，吞噬指数为12．3，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论B族链球菌表面蛋白C5a肽酶鼻内途径免疫小鼠后可在血清、肺及阴道、直肠等免疫近端和远端黏膜中产生相应高水平IgG及IgA抗体，上述ScpB抗体具有促进吞噬细胞吞噬B族链球菌的功能。

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