EBV即刻早期基因BZLF1腺病毒表达载体的构建及初步应用

作者：孙淑红; 王云; 王笑峰; 孙坚萍; 朱伟; 罗...bzlf1腺病毒载体ebv即刻早期基因

摘要：目的 构建EBV即刻早期基因BZLF1的重组腺病毒表达载体，探讨其表达诱导潜伏状态EBV进入裂解期增殖的作用。方法采用AdEasy系统构建携带BZLFl的重组腺病毒载体padBz，脂质体法转染人胚肾293细胞，包装产生重组腺病毒vAd-BZ。vAd-BZ感染EBV阳性细胞NEC后，采用RT-PCR、Westemblot、流式细胞术和MTT等方法检测目的基因表达，以及目的基因表达对EBV阳性细胞的影响。结果 PCR、序列测定以及限制性酶切证实BZLFI基因正确插入穿梭质粒，并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组，重组腺病毒表达载体构建成功。经293细胞包装获得具有稳定感染性的重组腺病毒vAd-BZ，感染重组腺病毒的NEC靶细胞可以检测到BZLF1基因的表达，进而诱导EBV从潜伏期进入裂解期。结论 重组腺病毒vAd-BZ可有效感染EBV阳性细胞NEC，诱导潜伏状态的EBV活化．讲而特异件杀伤EBV阳件肿瘤细胞。

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