Elafin重组气道上皮细胞对铜绿假单胞菌生物被膜的抗菌作用

作者：聂晓红; 周向东; 黄长武elafin生物被膜铜绿假单胞菌气道上皮细胞抗菌

摘要：目的 探讨Elafin重组气道上皮细胞对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）生物被膜（biofilm，BF）的抗菌作用。方法 体外平板法制备Pa生物被膜模型，用银染法及扫描电镜鉴定。体外培养A549细胞，将pEGFP-N1-Elafin重组到A549细胞，倒置荧光显微镜观察转染情况。采用猪胰弹性蛋白酶（NE组）、铜绿假单胞菌（Pa组）上清、大肠埃希杆菌（E．coli组）上清分别诱导孵育重组细胞24h，另设转染未含Elafin基因空载体的A549细胞作为对照组。将成熟BF载体放入4组中继续孵育8h，扫描电镜观察4组BF结构的变化，并于第8小时用四甲基偶氮唑盐（MTF）法测定细菌存活数。结果 扫描电镜下观察到3个诱导组的BF结构较对照组的BF明显松散，尤以Pa组和NE组为甚；NE组[（3．238±0．316）×10^6CFU／cm^2]、Pn组细菌数量[（3．317±0．247）×10^6CFU／cm^2]均较对照组[（5．946±0．453）×10^6CFU／cm^2]显著减少（P〈0．01），E．coli组细菌数量[（5．138±0．391）×10^6CFU／cm^2]较Pa组和NE组减少，差异均有统计学意义（P〈0．01）。3个诱导组BF细菌清除率与对照组相比分别为45．6％、44．2％和13．6％。结论 Elafin重组气道上皮细胞能有效清除尸n生物被膜中的细菌，而Pa产物也是F3afin表达的有效诱导物。

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