实时RT-PCR检测西尼罗病毒

作者：邓永强; 姜涛; 于曼; 秦成峰; 陈水平; 祝...西尼罗病毒感染pcr法检测流行病学研究病毒疾病组织标本病毒rna早期诊断细胞增殖vero参考标准黄病毒科病毒核酸病毒滴度早期监测特异性敏感性感染后mlpfu脑组织小鼠血液

摘要：目的建立西尼罗病毒快速、敏感和特异的实时RT-PCR法,用于西尼罗病毒疾病的早期诊断. 方法对Vero细胞增殖的西尼罗病毒分别进行常规RT-PCR和实时RT-PCR法扩增,以PFU/ml为参考标准,比较二者的敏感性和特异性.并用实时RT-PCR法检测西尼罗病毒感染的小鼠组织标本. 结果采用所建立的实时RT-PCR法和常规RT-PCR法可分别检测到0.02 PFU/ml和2 PFU/ml的西尼罗病毒RNA,前者的敏感性比后者高100倍.而对其他黄病毒科成员的检测均为阴性,表明该方法是特异的.采用这种实时RT-PCR法可从西尼罗病毒感染小鼠的血液、脾脏、肾脏和脑组织标本中检测出病毒核酸,且在感染后第2天最先自血液和脾脏中检测到病毒,在感染后1周的脑组织中的病毒滴度最高. 结论本研究建立的实时RT-PCR法具有很高的敏感性和特异性,因此该方法可用于西尼罗病毒疾病的早期监测和流行病学研究.

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