JC病毒样颗粒可直接转运进入细胞核

作者：屈秋民; 郭峰; 乔晋; 泽洋文; 长岛和郎病毒样颗粒hela细胞细胞核内vlp考马斯亮蓝vp1jcvvipjc病毒体外表达外壳蛋白表面标记荧光染料微镜观察细胞感染不同部位g细胞核转运dna包裹荧光素svg混合物外源性细胞浆培养检测

摘要：目的探讨JC病毒(JCV)病毒样颗粒(VLP)是否可以直接转运进入细胞核. 方法应用JCV主要外壳蛋白VP1体外表达、重组VLP,在其表面标记异硫氰基荧光素(FITC),同时在其内部包裹荧光染料Cy3,感染培养的HeLa细胞和SVG细胞,荧光显微镜观察VLP入核转运. 结果 HeLa和SVG细胞感染包裹Cy3的FITC-VLP时,FITC与Cy3同时出现于细胞核内相同部位;而感染FITC-VP1与Cy3混合物时,FITC虽可在细胞核内检测到,但Cy3信号几乎消失.包裹Cy3的VLP用SDS-PAGE展开,荧光显像后行考马斯亮蓝(CBB)染色,发现Cy3和VLP移行至不同部位,证明Cy3不能与VP1结合,提示VLP以完整的颗粒形式转运进入细胞核.应用包裹外源性DNA的VLP感染培养的HeLa和SVG细胞,发现包裹的DNA在细胞浆和细胞核内均可检测到,提示JCV入核过程与VLP相同. 结论 VLP可以不经裂解直接转运进入细胞核,JCV入核转运可能与VLP相同.

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