人肺腺癌GLC-82细胞提取热休克蛋白70抗瘤效应的研究

作者：刘志勇; 董驹; 张树波; 马立人; 李新; 王...人肺腺癌热休克蛋白70抗瘤效应细胞提取细胞裂解液治疗方法杀瘤作用培养条件胰蛋白酶edta细胞浓度高速离心消化液

摘要：为了寻找一种肺腺癌有效的治疗方法,我们探索肺癌GLC-82细胞产生的热休克蛋白70(HSP-70)的杀瘤作用.HSP-70的制备如下:常规培养的人肺腺癌GLC-82细胞经43℃ 30 min处理后,置常规培养条件下培育12 h,以EDTA-胰蛋白酶复合消化液分散细胞,调整细胞浓度为106/ml,加入10倍体积的细胞裂解液混匀,置4℃ 12～20 h,细胞裂解成絮状,经透析浓缩后以低温高速离心,DEAE-52离子交换色谱和SephdexG-200分子筛过滤及饱和硫酸盐析等方法分离,提纯HSP-70.经过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及酶联免疫吸附法(ELISA)进行定量定性检测.

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