人源性抗HBsAg单链Fab基因在酵母中的表达

作者：邓宁; 向军俭; 粟宽源抗hbsagfab基因单链乙型肝炎病毒抗乙肝表面抗原linker酵母表达载体人源性抗体噬菌体抗体重叠pcrchain垂直传播抗体基因治疗性新生儿库筛选

摘要：抗乙肝表面抗原的人源性抗体(Fab)在临床上有防治乙型肝炎病毒的应用前景,如用于预防新生儿乙型肝炎病毒的垂直传播和治疗性乙肝制剂等.本文将噬菌体抗体库筛选得到的人源性抗HBsAg Fab抗体基因,通过重叠PCR的方法借Linker将Fab的轻链(L链)和重链(H链)融合构建单一的链,即单链Fab(Single chain Fab)基因,并插入到酵母表达载体pPICZαA中.将构建的表达载体质粒pPICZαA-HL线性化,通过LiCl转化法转化毕赤酵母GS115,利用ZeocinTM抗生素筛选重组酵母,并用高剂量的ZeocinTM平板来筛选多拷贝整合有融合L、H链基因的重组酵母.

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