作者：付广; 王国斌; 卢晓明; 杨春生存素asodn裸鼠皮下移植瘤抑瘤率脂质体反义寡核苷酸瘤细胞rna组蛋白逆转录聚合酶链反应技术
摘要：目的探讨脂质体生存素反义寡核苷酸(ASODN)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及机理.方法将24只裸鼠建立人胃癌细胞系HS-746T皮下移植瘤模型,用不同的转染液处理后随机分成6组:空白对照组,脂质体组,正义链组,100、200和400 nmol/L反义链组(ASODN组).于注射相应试剂后2,4,8,12,16,20 d观测裸鼠移植瘤体积,计算抑瘤率和肿瘤缩小率,观察移植瘤细胞形态变化,免疫组化SP法检测生存素的表达,并用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR) 和Western blot蛋白免疫印迹法比较治疗后不同时间各组肿瘤组织中生存素 mRNA和蛋白表达的变化.结果注射后20 d空白组、脂质体组和正义链组裸鼠的抑瘤率无明显差异,而ASODN组移植瘤的体积随着时间和浓度的增加而减小,肿瘤缩小率则增大,抑瘤率均大于对照组,400 nmol/L ASODN组抑瘤率最大为93%.光镜下见ASODN组移植瘤凋亡细胞数增多,生存素表达减弱,6例(6/12)肿瘤组织有坏死液化灶.各ASODN组均能够下调移植瘤细胞生存素 mRNA含量,抑制生存素蛋白表达,注射20 d后400 nmol/L ASODN组蛋白表达为空白对照组的36.8%.结论生存素基因反义寡核苷酸能够通过诱导人胃癌裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡,下调生存素 mRNA和蛋白的表达,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长.
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