作者：邱镇; 孙颖浩; 许传亮; 王元天; 顾正勤; ...ptenp27kip1表达前列腺癌细胞凋亡
摘要：目的通过腺病毒介导转染前列腺癌PC-3细胞,探讨人10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白类似物(PTEN)和p27Kip1对肿瘤细胞增殖和凋亡等方面的影响及二者的协同作用. 方法构建携带人PTEN和p27Kip1基因的腺病毒载体,体外转染PC-3细胞,通过RT-PCR、Western blot检测目的基因不同水平的表达.采用细胞生长试验、流式细胞仪检测PC-3转染前后细胞增殖、细胞周期和早期凋亡率的变化.结果病毒滴度Ad-PTEN为1.8×107 pfu/ml、Ad-p27Kip1为1.2×109 pfu/ml,RT-PCR检测有PTEN-mRNA(462 bp)和p27Kip1-mRNA (320 bp),Western blot检测有PTEN蛋白(60 KD)和P27蛋白(27 KD)特异表达,可明显抑制PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,联合基因治疗组与单基因组相比差异有显著意义.结论成功构建携带人PTEN和p27Kip1的重组腺病毒载体,在前列腺癌细胞株PC-3得到了稳定、特异的高表达,联合基因疗法有望成为治疗前列腺癌的有效方法.
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