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碱性成纤维细胞生长因子对新生大鼠脑缺血后神经新生的影响

作者:孙金峤 沙彬 周文浩 杨毅成纤维细胞生长因子2脑缺血神经新生大鼠

摘要:目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生大鼠脑缺血后神经新生的影响。方法通过结扎3日龄新生SD大鼠双侧颈总动脉制备脑缺血模型,随机分为治疗组(36只):给予bFGF10ng/g侧脑室注射;对照组(36只)给予相同体积的生理盐水。另取36只新生大鼠,仅分离双侧颈总动脉,不结扎,不给予药物,作为假手术组。三组大鼠分别于术后第4、7、14天处死,获取脑组织标本,采用免疫荧光染色、Western印记和实时PCR方法,观察三组大鼠不同时点脑室下区巢蛋白(nestin)、Ⅲ型β-微管蛋白(Tuj1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和少突胶质细胞NG2蛋白及其mRNA的表达变化。结果(1)免疫荧光染色:治疗组BrdU^+/nestin^+细胞数目术后7d达高峰[(48.7士5.9)个/视野],高于同时点对照组[(32.2±3.1)个/视野]和假手术组[(17.3±1.6)个/视野],差异有统计学意义(P〈0.01);治疗组BrdU^+/Tuj1^+细胞、BrdU^+/GFAP^+细胞、BrdU^+/NG2^+细胞数目术后14d[分别为(92.6±9.7)、(58.2±6.1)、(57.3±5.4)个/视野]达高峰,高于同时点对照组[分别为(65.8±7.1)、(42.1±4.4)、(37.8±3.2)个/视野]和假手术组[分别为(35.3±3.1)、(33.6±3.4)、(22.4±2.1)个/视野],差异有统计学意义(P〈0.01)。(2)Western印迹和实时PCR.与免疫荧光染色结果一致,即治疗组nestill蛋白和mRNA表达术后7d达高峰,高于同时点对照组和假手术组,差异有统计学意义(P〈0.01);治疗组Tuj1、GFAP和NG2蛋白和mRNA术后14d达高峰,高于同时点对照组和假手术组,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论bFGF可促进新生大鼠脑缺血后脑室下区神经干细胞的增殖以及向功能神经细胞(神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞)的分化,可能对新生大鼠脑缺�

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