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荧光定量PCR检测孕妇血浆中胎儿DNA的研究

作者:刘福民; 冯霞; 王秀英; 王文; 叶月仙; 陈...妊娠胎儿dna基因sry聚合酶链反应

摘要:目的探讨荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)方法检测孕妇血浆中胎儿DNA的可行性,探讨胎儿DNA在孕妇血浆中的含量及其在孕期的变化规律.方法以胎儿SRY基因序列作为胎儿DNA在孕妇血浆中的标志,应用荧光MGB(Minor Groove Binder)探针实时定量PCR方法连续测定30例孕妇在不同孕期和产后共237份血浆标本中胎儿DNA的含量.结果使用该方法最低可检测到20 000个女性DNA中的一个男性DNA.孕妇血浆中最早检出SRY序列的时间为孕6+6周.孕8周起,所有怀男胎孕妇的标本中均可检出SRY序列,其含量随着妊娠的进展而增高,在晚期妊娠达高峰,产后24~48 h血浆中SRY序列检测均为阴性.胎儿DNA在孕妇血浆总DNA含量中的相对浓度分别为孕早期4.88%、孕中期6.10%、孕晚期4.77%.全部实验无假阳性和假阴性出现.结论FQ-PCR方法是一种灵敏度和准确性高,特异性强的定量检测孕妇血浆中胎儿游离DNA的方法,孕妇血浆中存在高浓度的胎儿DNA,可用于无创伤性产前基因诊断.

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