作者：田东梅; 李亨利; 朱明辉; 单旭东; 庄静; ...kgn细胞细胞凋亡
摘要：目的观察脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone，DHEA）对体外人卵巢细胞——KGN细胞株凋亡的影响。方法用不同剂量的DHEA（0.01 mmol/L、0.1 mmol/L、1 mmol/L、10 mmol/L）处理体外培养的KGN细胞，以不加DHEA为阴性对照组，然后分别用CCK-8法和流式细胞术检测KGN细胞的活性和凋亡情况；并通过实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应（real-time fluorescent quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测雄激素受体（androgen receptor，AR）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，BCL-2）和BCL-2相关X蛋白（BCL-2 associated X protein, BAX）基因mRNA的表达水平；通过蛋白免疫印迹（Western blotting）检测AR、BCL-2、BAX、细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）及磷酸化ERK（P-ERK）的表达水平。结果与阴性对照组相比，经DHEA处理的KGN细胞的活力显著下降（P=0.000），而且随着DHEA剂量的增加，KGN细胞的凋亡率也随之提高，其中10 mmol/L DHEA干预组的凋亡率与阴性对照组相比，差异具有统计学意义（P=0.019）；用不同浓度DHEA处理KGN细胞后，细胞中BCL-2蛋白的表达水平随着DHEA浓度的增加逐渐降低，其中10 mmol/L DHEA干预组与阴性对照组相比差异有统计学意义（P=0.007）；与阴性对照组相比，0.1 mmol/L和10 mmol/L DHEA干预组细胞中BCL-2 mRNA的表达水平也显著降低（P=0.007，P=0.012）；而细胞中AR和BAX的表达水平无显著变化（P〉0.05）；此外，虽然DHEA干预组KGN细胞中ERK蛋白的表达水平与阴性对照组相比，差异无统计学意义（P〉0.05），但P-ERK蛋白的表达水平随着DHEA浓度的增加逐渐降低，其中10 mmol/L DHEA干预组细胞中P-ERK蛋白的表达水平显著降低（P=0.005）。结论DHEA能抑制KGN细胞的生长而促进其凋亡，并伴随着细胞中BCL-2蛋白和P-ERK蛋白表达水平的下降。
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