作者：王璐; 何永林; 李芳菲; 彭彦; 姜蓉; 王亚...胚胎生殖细胞小干扰rnananog
摘要：目的：建立胚胎生殖细胞中沉默多能干细胞特异转录因子Nanog表达的方法。方法：通过检测碱性磷酸酶、SSEA-1和Oct4标志蛋白，鉴定体外培养的胚胎生殖细胞（EG细胞），通过脂质体介导作用，将Nanog特异性小干扰RNA（siRNA）转染EG细胞，应用半定量RT—PCR检测转染24h、36h、48h后EG细胞中NanogmRNA的表达水平，并应用免疫荧光技术检测转染36h、48h后EG细胞中Nanog蛋白的表达水平。结果：培养细胞具有高度碱性磷酸酶活性，SSEA-1、Oct4阳性，为保持未分化状态的EG细胞。转染后NanogmRNA和蛋白表达均受到抑制。结论：脂质体介导siRNA能有效沉默EG细胞中Nanog基因的表达，为进一步探讨Nanog对胚胎生殖细胞的调控机制奠定了基础。
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