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同源框基因HOXA11顺式作用元件具有启动子活性及孕激素应答元件功能

作者:宗华凤; 王莉芬; 唐颖; 王学慧; 吕丽hoxa11基因顺式作用元件表达载体ishikawa细胞

摘要:目的:探讨HOXA11基因顺式作用元件是否存在启动子及孕激素应答元件序列。方法:采用PCR技术以人基因组DNA为模板,扩增含HOXA11川页式作用元件序列的DN段:将扩增片段与无启动子的强化绿色荧光蛋白报告基因载体pEGFP.1多克隆位点连接,构建HOXA11基因顺式作用元件的表达载体pEGFP—HOXA11;用脂质体法将表达载体转染到Ishikawa细胞中,在荧光显微镜下观察重组HOXAl1基因顺式作用元件的启动活性,以及转染细胞经孕酮处理后细胞内绿色荧光蛋白表达水平的变化。结果:成功地将HOXA11基因顺式作用元件克隆到报告基因载体pEGFP-1中,酶切和PCR鉴定以及DNA序列分析无误;转染pEGFP-HOXA11表达载体的Ishikawa细胞能表达发出绿色荧光的报告基因蛋白,而且经孕酮处理后绿色荧光强度明显增强。结论:HOXA11基因顺式作用元件具有启动子活性和孕激素应答元件功能。

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中华生殖与避孕

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