作者：张怡; 潘敏; 邓志婷; 李文娟; 方义杰; 严...脑胶质瘤c6细胞单纯疱疹病毒胸苷激酶阳离子脂质体基因转染聚焦超声更昔洛韦大鼠
摘要：目的探讨聚焦超声对载单纯疱疹病毒胸苷激酶（herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK）基因阳离子脂质体体外基因转染的影响,及其联合更昔洛韦（ganciclovir,GCV）对大鼠脑胶质瘤C6细胞的影响。方法制备含HSV-TK基因质粒,利用阳离子脂质体转染至对数期大鼠胶质瘤C6细胞,并随机分为脂质体组和超声1、2、3、4min组,脂质体组加入含9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液;超声1、2、3、4min组在脂质体组基础上分别给予体外超声（1 MHz,功率3W/cm2,电压150mvPP）辐照1、2、3、4min。5组C6细胞均于37℃、体积分数5%CO2培养箱,含体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM完全培养液,继续培养48h。转染48h后,荧光显微镜下观察载HSV-TK基因阳离子脂质体转染效率。将对数生长期C6细胞接种于96孔板,依据转染效率实验结果分为GCV组、超声3min＋GCV组,超声3 min＋GCV组加入9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液,并超声辐照3min,GCV组转染空白阳离子脂质体;转染24h后,2组均分别加入0.1、1、10、50、100、1 000mg/L GCV作用48h,采用分光光度法检测C6细胞存活率。结果转染48h后,超声1、2、3、4min组C6细胞HSV-TK基因转染效率[（0.14±0.07）%、（1.39±0.11）%、（19.61±4.80）%、（18.81±7.92）%]均高于脂质体组[（0.05±0.01）%]（P〈0.05）,且超声3、4min组转染效率高于超声1、2min组,超声2 min组转染效率高于超声1 min组（P〈0.05）,超声3 min组与超声4min组转染效率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;随GCV浓度增加,GCV组和超声3min＋GCV组C6细胞存活率均逐渐降低;GCV为50、100、1 000mg/L时,超声3min＋GCV组C6细胞存活率[（85.88±1.80）%、（75.51±1.43）%、（68.17±5.26）%]均低于GCV组[（95.40±0.85）%、（92.62±4.50）%、（83.66±0.98）%]（P〈0.05）;GCV为0.1、1、10mg/L时,超声3min＋GCV组C6细胞存活率[（99.32±3.01）%、（97.01±1.53）%、（94.50±1
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