作者：刘含若; 袁博伟; 安莹; 万修华晶状体囊异硫氰酸细胞系晶状体上皮细胞生物模型后发行白内障
摘要：背景 研究已证实莱菔硫烷（SFN）为一种有效的化学预防剂，能调控生物体不同的分子机制以抑制细胞的无序生长。自噬是人体细胞维持自身内环境的生物过程，探讨SFN对晶状体上皮细胞（LECs）生物学行为的影响及其与细胞自噬的关系有助于为后发性白内障（PCO）的预防和靶向治疗提供新的思路。目的 探讨SFN诱导人LECs凋亡的直接作用及其激发细胞自噬潮的作用机制。方法 将离体24 h内的人供体眼行常规白内障超声乳化手术，取出的完整晶状体囊袋置于含体积分数2%胎牛血清的EMEM中培养，建立PCO囊袋模型。按照分组分别于培养基中添加0（空白对照组）、1、10和100 μmol/L SFN培养30 d，观察各组晶状体囊袋上细胞的生长情况，并采用免疫荧光技术检测细胞中F-actin和Vimentin的表达。用含5%胎牛血清的EMEM培养晶状体上皮细胞系FHL124，将培养的细胞分为空白对照组1、10、30和100 μmol/L SFN处理组，行乳酸脱氢酶（LDH）释放试验以测定各组细胞LDH释放的百分率；采用划痕试验检测各组细胞划痕面积的变化以评估细胞迁移能力；透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬囊泡的超微结构及数量；采用Western blot法检测SFN组、SFN＋3-MA组和3-MA处理的细胞自噬活动特异蛋白LC3的相对表达。结果 各不同质量浓度SFN组晶状体囊袋上细胞覆盖率总体比较差异有统计学意义（F＝48.57，P〈0.01）。10 μmol/L SFN组明显低于空白对照组和1 μmol/L SFN组。免疫荧光检测技术表明空白对照组增生细胞中F-actin和Vimentin染色阳性，增生的细胞排列致密，随着SFN质量浓度升高，F-actin和Vimentin阳性细胞密度下降，100 μmol/L SFN组未发现F-actin和Vimentin阳性细胞。空白对照组及1、10、30和100 μmol/L SFN组细胞LDH释放量（A值）分别为0.19±0.03、0.39±0.06、0.56±0.07、0.68±0.08和0.89±0.09，其中10、30、100 μmo
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