作者：周琨; 高晓唯; 蔡岩; 李文静; 胡裕坤; 田...角膜移植免疫耐受受体
摘要：背景 角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的 研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDCs）对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的影响,并探讨其可能的机制.方法 取1只雄性Wistar供体大鼠股骨骨髓分离和培养骨髓源imDCs,用携带大鼠CCR7基因的重组Ad转染imDCs,收集1＆#215;107个imDCs重悬于500μl含体积分数1％胎牛血清的PBS中.将60只受体SD大鼠以角膜碱烧伤法建立高危角膜移植模型,并用30只Wistar大鼠角膜作为供体进行同种异体角膜移植.采用随机数字表法将SD大鼠分为PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组,每组15只,按照分组不同分别于术前7d和术后3d经尾静脉注射相应溶液.术后每日裂隙灯显微镜下观察角膜植片存活情况,术后14d每组任意处死6只大鼠,取角膜植片行常规组织病理学检查,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测辅助性T细胞1（Th1）型细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的mRNA表达水平.结果 PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组和imDCs＋Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间分别为（10.44±1.88）、（16.00±2.18）、（15.11±2.03）和（23.67±2.83）d,4个组间总体比较差异有统计学意义（F=53.005,P=0.000）;与PBS组比较,未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间均明显延长,差异均有统计学意义（t=5.220、4.385、12.423,均P=0.000）;imDCs＋Ad-CCR7组植片的平均存活时间较未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组均明显延长,差异均有统计学意义（t=7.204、8.039,均P=0.000）.RT-PCR结果显示,与PBS组相比,未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组、imDCs＋Ad-CCR7组大鼠IFN-γ mRNA
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