作者：宋伟涛; 夏晓波; 熊思齐内皮血管生长物质基因治疗动物模型
摘要：背景脂质体介导缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）特异性双链RNA（dsRNA）能够有效抑制鼠视网膜新生血管，抑制效率与其剂量比相关。目的探讨HIF-1α dsRNA抑制鼠视网膜新生血管的剂量-效应关系。方法采用Smith的方法，将出生后7d的C57BL／6J小鼠置于氧舱内，控制氧体积分数为（75±3）％，5d后正常氧环境喂养7d后处死；采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC—Dextran）荧光造影视网膜铺片观察视网膜新生血管的形态，鉴定视网膜新生血管模型。将出生后7d的8只小鼠于空气中喂养，为正常组。另51只8日龄小鼠放入（75±3）％的高氧环境中，5d后出舱并随机分为对照组（3只）、空载体组（3只）和基因治疗组，基因治疗组按照剂量比例（脂质体：质粒）亚分为9个组，每组5只。出舱当天空载体组小鼠玻璃体腔内注射空载体pSilencer2．1-U6hygro，基因治疗组按照不同剂量比例注射HIF-1α dsRNA表达质粒pSilencer2．1-U6hygro，均采用脂质体介导。对照组小鼠不作任何处理。注射后7d采用FITC—Dextran荧光造影视网膜铺片观察视网膜新生血管的形态变化，采用病理切片统计突破内界膜的血管内皮细胞细胞核数，采用免疫组织化学法检测视网膜中血管内皮生长因子（VEGF）的表达差异。结果视网膜铺片荧光造影发现，正常组视网膜血管分布呈规则均匀的网状结构。对照组和空载体组视网膜血管不规则扩张，中周边部有大量血管新生。基因治疗组中央区视网膜血管迂曲及不规则扩张较对照组和空载体组明显减轻，其中脂质体：质粒为1：1组更为明显。病理切片显示，正常组很少见到突破视网膜内界膜的内皮细胞细胞核，而对照组和空载体组中均大量出现，其发生率为100％。各基因治疗组均较对照组的（11．57±5．85）个和空载体组的（11．53±6．15）个明显减少，其中脂质体：质粒
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