作者：金玲; 陈剑; 吴静; 徐锦堂; 周清; 赵松滨羊膜上皮细胞角膜上皮细胞细胞培养
摘要：目的应用培养的兔羊膜上皮细胞（AECs）体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料，探讨利用AECs重建角膜表层的可行性。方法取妊娠晚期新西兰大白兔（27～28孕周）的羊膜，制成AECs单细胞悬液，用含血清和表皮生长因子（EGF）的DMEM／F12培养液培养、传代，利用免疫组织化学单克隆抗体AE1／AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白ck3／12的表达；将体外培养的2～3代兔AECs种植在新鲜兔角膜基质上，利用气-液界面培养法使之复层化，体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料，进行光学显微镜和扫描电镜观察，并进行免疫组织化学测定。结果体外培养的兔AECs呈现单克隆抗体AE1／AE3、AE5表达阳性，AECs在新鲜兔角膜基质上能形成形态类似于正常角膜上皮细胞的3～5层复层结构，且复层化后的上皮细胞单克隆抗体AE5表达阳性。结论应用培养的AECs能成功构建类似角膜表层的复层上皮细胞-角膜基质移植材料，AECs可能成为重建角膜表层的一种新的细胞来源。
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