作者：严宏; 刘兵; 俞兰; 王为农翻译后修饰糖皮质激素分子伴侣白内障
摘要：目的研究糖皮质激素对α-晶状体蛋白分子伴侣功能的影响.方法凝胶过滤层析分离αL和βL-晶状体蛋白,αL-晶状体蛋白与25 mmol/L泼尼松龙-21-半琥珀酸(P-21-H)孵育20 d(37℃),分别于0、2、4、10和20 d应用βL-晶状体蛋白热聚集法测定分子伴侣活性,采用PerkinElmer LB50B荧光光度仪观察色氨酸和非色氨酸荧光值,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳监测蛋白质交联程度.结果被P-21-H修饰后的αL-晶状体蛋白分子伴侣功能显著降低.P-21-H可导致αL-晶状体蛋白色氨酸荧光强度明显降低,非色氨酸荧光强度向较长波长移位和增强,提示形成新的荧光色素物.孵育第10 d,伴侣活性已降低至约3.3%,色氨酸荧光强度殆尽,约在激发波长412 nm出现新的非色氨酸荧光强度.SDSPAGE显示糖皮质激素导致αL-晶状体蛋白明显凝聚.结论糖皮质激素对α-晶状体蛋白的修饰和伴侣活性的降低可能参与糖皮质激素诱导白内障的形成.
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