作者：鲍玉洲; 张立华; 李建新hegf角膜基因表达角膜损伤治疗
摘要：目的观察人表皮生长因子(hEGF)基因对角膜细胞的转染情况,探讨用hEGF基因对角膜损伤治疗的可行性.方法利用基因重组技术构建了hEGF全基因序列,将该基因序列插入pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒,用脂质体包裹注入家兔角膜前房.从RNA、DNA和蛋白质水平分别测定了角膜组织中hEGF mRNA和DNA的表达,用免疫组化法测定了hEGF在兔角膜组织中的表达.结果基因转染24h后在全层角膜细胞内可见hEGF mRNA、DNA和蛋白质表达,第5d达到高峰,细胞转染率高达98%以上,随后逐渐降低,可持续表达20d以上.结论用pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒作为载体,携带hEGF基因在脂质体包裹下经前房注射转染角膜,可达到极高的转染率,具有良好的应用前景.
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