作者：华振宇; 赵宏; 朱冬梅; 高延庆; 张蕾; 李...视网膜色素上皮细胞mtt流式细胞技术免疫组织化学染色方法
摘要：目的探讨不同浓度的Bcl-2反义寡核苷酸(bcl-2 AS-ODN)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生活性的影响.方法使用不同浓度(0、15、30、45、60μmol/L)的bcl-2 AS-ODN和bcl-2 S-ODN处理人RPE细胞24h后,使用MTT、氚-标记脱氧胸苷掺入试验(3H-TdR)测定RPE细胞增生的抑制率及DNA合成抑制率;使用流式细胞仪检测其对RPE细胞周期的影响;使用免疫组织化学染色法检测不同浓度bcl-2 AS-ODN作用下的RPE细胞bcl-2的表达.结果不同浓度bcl-2 AS-ODN处理过的RPE细胞的抑制率和DNA合成抑制率随bcl-2 AS-ODN浓度的增高而升高,bcl-2 AS-ODN将RPE细胞阻滞在G0/G1期,免疫组化结果显示:bcl-2 AS-ODN可抑制RPE细胞bcl-2的表达.结论bcl-2 AS-ODN对RPE细胞的增生有抑制作用且呈浓度依赖性,这一结果有可能成为增生性玻璃体视网膜病变(PVR)基因治疗的一个新靶点.
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