作者：宗建春; 吴诚义; 吴凯南三氧化二砷as2o3免疫细胞化学染色人乳腺癌细胞株westervegf基因mrna低氧条件培养模型方法建立blot表达变化细胞生存不同浓度剂量递增
摘要：目的研究低氧条件下人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S血管内皮生长因子(VEGF)的表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响.方法建立MD-MBA-435S细胞体外低氧培养模型.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学染色和Wester blot分别检测0.5、2.0、5.0 μmol/L As2O3对缺氧12 h后乳腺癌细胞VEGF基因及蛋白的表达变化;噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度As2O3对乳腺癌细胞生存的影响.结果高浓度As2O3可以抑制乳腺癌细胞的生存,而低浓度则对此影响较小.缺氧12 h后VEGF mRNA和蛋白皆明显增加;3种浓度As2O3对常氧下乳腺癌细胞VEGF mRNA和蛋白无明显影响,而对缺氧12 h后细胞VEGF mRNA和蛋白的表达明显抑制,且呈剂量递增效应.结论缺氧可以显著增加乳腺癌细胞VEGF的表达;常氧下As2O3对乳腺癌细胞VEGF的表达无明显抑制,而在低氧下可以明显抑制,其机制可能是通过调控VEGF的上游基因实现的.
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